纯化方法主要分为以下三类:
溶剂提取法:将茶叶用极性溶剂浸渍,然后把浸取液进行液—液萃取分离,最后浓缩得到产品。目前工业化生产主要采用此法。产品收率5%~10%,产品纯度为80%~98%。所用溶剂有丙酮、乙醚、甲醇、已烷及三氯甲烷等。该法生产成本高,且易造成污染。
离子沉淀法:用金属沉淀茶多酚,使其与咖啡碱分离,该方法使用了对人体有毒的重金属作沉淀剂,所以,用该法生产的产品难达到食品和医药行业的要求。
柱分离制备法:已有报道的凝胶柱、吸附柱和离子交换柱法。此项技术的关键是柱填充料和淋洗。研究表明,采用柱分离制备法,茶多酚得率在4%~8%之间,纯度可达98%,但柱填充料非常昂贵,而且淋洗时要用多种和大量有机溶剂,显然不适合工业化生产。
2. 黄酮类化合物的提取方法有哪些
1、醇提取法
黄酮类化合物提取最常用一种方法,常用的有机溶剂主要有乙醇、乙醚、甲醇和乙酸乙酯等,其中乙醇是最常用的。
2、微波提取法
微波提取技术又称微波萃取技术,其最大的优点是耗能耗材少、无污染,尤其对特定的药材提取具有高选择性。
3、超临界萃取技术
超临界萃取是一种较广泛使用的药物提取、分离手段,其最大的优点是无有机溶剂残留,保证了提取成分的100%纯天然。
4、酶解法
酶解法是一种较好的辅助提取方法。酶具有高度的选择性,因此对不同提取材料,选择合适的酶对提取率影响较大。
5、膜分离提取法
膜分离技术也是一种常用的辅助提取技术,其中超滤法作为唯一能用于分子级别的分离方法广泛的应用于黄酮类化合物的提取分离。利用超滤技术分离纯化黄酮化合物最大的优点是操作简便、无需加热、不破坏活性成分的结构,纯化和浓缩一步完成,超滤装置还可反复使用。
(2)铁皮石斛黄酮的纯化扩展阅读
黄酮类化合物的颜色与分子中存在的交叉共轭体系及助色团(-OH)等的类型、数目及取代位置有关。一般来说,黄酮、黄酮醇及其苷类多呈灰黄至黄色,查尔酮为黄色至橙黄色,而二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮类等因不存在共轭体系或共轭很少,故不显色。
花色素及其苷元的颜色,因pH的不同而变,一般呈红(pH<7)、紫(7<8.5)、蓝(PH>8.5)等颜色。
黄酮苷元一般难溶或不溶于水,易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂,易溶于稀碱液。黄酮类化合物的羟基糖苷化后,水溶性相应加大,而在有机溶剂中的溶解度相应减少。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂,难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。
黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性,故可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。有些黄酮类化合物在紫外光(254nm或365nm)下呈不同颜色的荧光,氨蒸汽或碳酸钠溶液处理后荧光更为明显。多数黄酮类化合物可与铝盐、镁盐、铅盐或锆盐生成有色的络合物
3. 铁皮石斛成分检测
铁皮石斛经过国家药检局检验中心分析,主要的成份为石斛多糖、石斛碱、石斛酚、石斛胺、氨基酸(18种),还有特殊的菲类、联芐类抗癌成分,石斛多糖含量高达22%,其中经药理实验证明,铁皮石斛的药用成分能够滋阴、补五脏虚劳、厚肠胃、扩张血管、降血压、降血糖、抑制脂质过氧化,对心血管系统有积极作用,能提高人体免疫力、增加记忆力。
迅速恢复质,抗氧化、抗衰老,促进胃液分泌而助消化,特别是石斛多糖能显著提高人白细胞数量,对肿瘤细胞有很好的抑制功效。中国人民解放军卫生检测中心的检测报告说,石斛除含有18种氨基酸外。
还含有钙、铁、锌、硒、钾、镁、钠等矿物质,维生素方面主要含有硫胺素、核黄素和维生素C,特别是含有槲皮素、杨梅黄酮、莰二菲醇、芹菜配基、玉米黄酮等抗氧化、抗衰老、降血糖、保肝润肺、软化血管、抗肿瘤等多种保健功效物质。铁皮石斛的神奇药效受到了科技人员的重视和关注。
进入20世纪80年代,我国不少医药学者和科研机构对铁皮石斛的药效进行研究,作了以下阐述:1985年,中山医科大学的研究表明:铁皮石斛具有增强T细胞、B细胞、NK细胞和吞噬细胞的作用,对治疗鼻咽癌、贺奇金病、菲贺奇金淋巴瘤等多种恶性肿瘤有非常好的疗效,是一类前景可喜的中药免疫增强剂,可作为新的抗癌药物。
1992年,福建中医学院研究发现,铁皮石斛有抗衰老功能,能大幅度提高动物内SOD(延缓衰老的主要物质)水平,从而增强其抗衰老的功能,李时珍所言的石斛能“轻身延年”的作用得到了现代科技的验证。1993年,浙江医科大学进行药理测试证实,铁皮石斛有显著提高机体免疫力功能,抗衰老,刺激唾液分泌,抗疲劳,耐缺氧等方面的作用。
1996年,中科院华南植物研究所和中山医科大学肿瘤研究所通过动物实验,证实铁皮石斛多糖能显著提高外周白细胞数和促进淋巴细胞移动抑制因子,强有力地清除实验条件下免疫抑制剂环磷酰胺的加入所引发的副作用,因此它能提高机体免疫功能,是一种很有价值的中药类免疫增强剂。
2000年,经浙江省卫生防疫站检测表明有辅助抑制肿瘤的作用,浙江省已经将铁皮石斛列为癌症患者的医保用药。
4. 植物中如何对黄酮类进行细提取
传统的萃取芝法有有机溶剂萃取,热水萃取,碱性水或碱性稀醇萃取体系溶剂萃取法。
乙醇和甲醇是提取黄酮类化合物最常用的溶剂,糖原的提取宜采用浓度较高的酒精(如9% ~ 9%),糖原的提取宜采用浓度约为%的乙醇或甲醇溶液,乙酸乙酯和丙酮也常用来提取黄酮类化合物,萃取过程包括冷浸、渗滤和回流。
(4)铁皮石斛黄酮的纯化扩展阅读:
含黄酮类高的植物:
柠檬、柑橘等含有黄酮。早年柠檬皮的提取物中的一种白色结晶被称为维生素P,实际上这是黄酮类混合物而非单一物质。
黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中,总数大约有4千多种,其分子结构不尽相同,如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。银杏、山楂、蓝梅、酸果、葡萄、接骨木果、洋葱、花椰莱、绿茶等都含有黄酮。
银杏叶:银杏叶主要含黄酮类和萜烯内酯类化合物,含量很高,目前是提取黄酮的重要原料。
刺梨:这是产于云贵的一种植物,富含芦丁黄酮,是目前植物中芦丁黄酮含量最高的。
5. 柑橘属中黄酮类化合物的提取分离
柑橘属类黄酮多以极性较大的糖苷形式存在,目前广泛采用极性较大的有机溶剂进行浸提。对胡柚皮的提取工艺表明,在乙醇浓度90%,料液比1:5,提取2h,提取温度40-60℃时类黄酮提取率较高。研究化橘红用8倍量80%乙醇回流提取3次,1·5 h/次,得到较大的提取率。研究枳实药材中总黄酮提取工艺,得到60%的乙醇,8倍量,回流提取2次,每次1·5 h。近年来微波、超声波辅助提取法应用于植物细胞的破壁,有效地提高了有机物的吸收率,缩短提取时间,提高效率。对于柑橘属类黄酮的分离纯化,目前应用最广的为HPLC、柱层析、薄层层析等方法。近年来采用超临界CO2萃取也获得了纯度较高的类黄酮。同时采用树脂提取技术也得到了很好的应用,由于树脂稳定性好、再生简单等优点,也是一种有效的黄酮类物质分离纯化材料,柚皮黄酮经大孔树脂纯化后总黄酮含量达到39·67%,回收率为62·48%。
6. 分离纯化黄酮类化合物的大孔树脂柱用什么管
问题中提到大孔吸附树脂、分离类型。
首先,每一类高分子吸附剂都可以制备成大孔型。具体能分离何种类型物质,主要看吸附树脂所用的材料。
例如:非离子型的:聚苯乙烯型树脂、甲基丙烯酸酯类吸附树脂,聚丙烯腈、聚乙烯醇、聚酰胺、聚丙烯酰胺、聚乙烯亚胺、纤维素衍生物等。弱极性的,主要用于水或极性溶剂中非极性物质的吸附;中极性的,可用于水中非极性物质的吸附或非极性溶剂中极性物质的吸附;极性,强极性,可吸附非极性溶剂中的极性杂质。
又如,离子交换树脂,除了具有离子交换功能外,还有脱水、脱色,吸附、催化等功能,常见如水处理制备去离子水、糖和多元醇的脱色精制、废水处理回收贵金属,抗生素和生化药物的分离精制等。应用的最多的离子交换树脂的母体是交联聚苯乙烯。
再如:螯合树脂,根据螯合剂对金属离子有选择性的络合,富集的原理,可用于提炼贵金属和稀有元素。
7. 游离黄酮和蒽醌的提取都可以采用什么方法
离.
二 分离方法:
1 蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离:用分步提取法(如前述) 2 游离蒽醌衍生物的分离:可选用分步结晶法、梯度pH萃取法或层析法进行.
梯度pH萃取法是分离游离蒽醌衍生物的经典方法:
1.局限性
2.原理 性质相似,酸性差别不大的混合物不适用
3 有些蒽酮虽然存在酚羟基,但在稀碱溶液中较相应的蒽醌难溶,
如大黄酚蒽酮-9,故蒽醌衍生物的苯提取液用极稀的NaOH液萃取,可除去蒽醌而使蒽酮留在苯液中. 示例
色谱法在蒽醌苷元分离中的应用:
一般先用经典方法(如梯度pH萃取)对其进行初步分离,再结合柱色谱法或制备性TLC法作进一步的分离,多用硅胶吸附色谱,而氧化铝一般不用,也常用聚酰胺作为柱色谱的填料.
•
三、 黄酮类化合物的提取与分离
(一)提取
黄酮甙类以及极性稍大的甙元(如羟基黄酮等),一般可
用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取.一些多糖甙类可用沸水提取.在提取花青素类化合物时,可加入少量酸(0.1%盐酸,应当慎用,避免发生水解).
剂进行提取.对得到的粗提物可进行下列精制处理,常用方法有:
(一)溶剂萃取法 利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同,选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的.例如植物叶子的醇浸液,可用石油醚处理,以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素.而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇,以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质.
有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行.常用的溶剂系统有:水-醋酸乙酯,正丁醇-石油醚等.
溶剂萃取过程在除去杂质的同时,往往还可以收到分离甙和甙元或极性甙元与非极性甙元的效果.
(二)碱提取酸沉淀法 黄酮甙类虽有一定极性,可溶于水,但却难溶于酸性水,易溶于碱性水,故可用碱性水提取,再于碱水提取液中加入酸,黄酮甙类即可沉淀析出.此法简便易行,如芦丁、橙皮甙、黄芩甙的提取都应用了这个方法.
兹以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程. 槐米(槐树Sophora japonica L. 花蕾)加约6倍量水,煮沸,在搅拌
下缓缓加入石灰乳至pH8~9,在此pH条件下微沸20~30分钟,趁热油滤,残渣同上再加4倍水煎1次,乘热抽滤.合并滤液在60~70℃下,用浓盐酸调至pH为5,搅匀,静置24小时,抽滤.沉淀物水洗至中性,60℃干燥得芦丁粗品,于水中重结晶,70~80℃干燥得
芦丁纯品.
在用碱酸法进行提取纯化时,应当注意所用碱液浓度不宜过高,以免在强碱性下,尤其加热进破坏黄酮母核.在加酸酸化时,酸性也不宜过强,以免生成(金羊)盐,致使析出的黄酮类化合物又重新溶解,降低产品收率.
当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时,如花、果类药
材,宜用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取,以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀,不致溶出.这也有利于黄酮类化合物的纯化处理.
(三)碳粉吸附法 主要适于甙类的精制工作.通常,在
植物的甲醇粗提取物中,分次加入活性炭,搅拌,静置,直至定性检查上清液无黄酮反应时为止.过滤,收集吸甙炭末,依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇溶液进行洗脱,各部分洗脱液进行定性检查(或用PPC鉴定).通过对Baptisia lecontei 中黄酮类化合物的研究证明,大部分黄酮甙类可用7%酚/水洗下.洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积,再用乙醚振摇除去残留的酚,余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮甙类成分.
8. 请问有没有铁皮石斛的各成分的化学结构式。多谢!
成分组成
利用多种色谱方法,从铁皮石斛药材分离出单体化合物72个,通过现代波谱技术鉴定了63个,发现新化合物18个,所得化合物的结构类型如下。 苯类及其衍生物共27个:铁皮石斛素A,铁皮石斛素B,铁皮石斛素C,铁皮石斛素D,铁皮石斛素E,铁皮石斛素F,铁皮石斛素G,铁皮石斛素H,铁皮石斛素I,铁皮石斛素J,铁皮石斛素K,铁皮石斛素L,铁皮石斛素M,铁皮石斛素N,铁皮石斛素O,铁皮石斛素P,铁皮石斛素Q,4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄,3,4-二羟基-5,4′-二甲氧基联苄,3′-羟基-3,4,5′-三甲氧基联苄,4,4′-二羟基-3,3′,5-三甲氧基联苄,3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄,3′,4-二羟基-3,5′-二甲氧基联苄,二氢白藜芦醇,dendromoniliside E,denbinobin,2,4,,7-三羟基-9,10-二氢菲。 酚类化合物12个:N-p-香豆酰酪胺,反-N-(4-羟基苯乙基)阿魏酸酰胺,二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯,二氢阿魏酸酪胺,对羟基苯丙酰酪胺,丁香酸,丁香醛,香草酸,对羟基苯丙酸,对羟基桂皮酸,阿魏酸,对羟基苯甲酸。 木脂素类化合物4个:(+)-丁香脂素-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,icariolA_2-4-O-β-D-gluranoside,(+)-lyoniresinol-3a-O-β-D-gluranoside,及裂异落叶松脂醇。 内酯类化合物2个:钩状石斛素和洋地黄内酯。 二氢黄酮类化合物2个:柚皮素和3′,5,5′,7-四羟基二氢黄酮。 其他类型化合物16个:铁皮石斛素R,erigesideⅡ,腺苷,尿苷,蔗糖,5-羟甲基糠醛,koaburaside,反式阿魏酸二十八烷基酯,对羟基反式肉桂酸三十烷基酯,对羟基顺式肉桂酸三十烷基酯,胡萝卜苷,β-谷甾醇,十六烷酸,十七烷,三十一烷醇,及十七烷酸。 18个新化合物为:铁皮石斛素A,铁皮石斛素B,铁皮石斛素C,铁皮石斛素D,铁皮石斛素E,铁皮石斛素F,铁皮石斛素G,铁皮石斛素H,铁皮石斛素I,铁皮石斛素J,铁皮石斛素K,铁皮石斛素L,铁皮石斛素M,铁皮石斛素N,铁皮石斛素O,铁皮石斛素P,铁皮石斛素Q,及铁皮石斛素R。 对部分单体化合物进行了抗氧化和抗肿瘤活性初筛,发现大多数联苄类化合物具有抗氧化活性;有2个联苄类化合物具有抗肿瘤活性。[5]成分比较
比较铁皮石斛和金钗石斛在化学成分上的差别:方法用高效液相色谱-质谱联用(HPLC/MS)法,比较铁皮石斛和金钗石斛氨性氯仿提取物中各成分的色谱峰相对积分面积和含量。结果:铁皮石斛和金钗石斛中电喷雾电离质谱质量数为偶数的色谱峰的相对积分面积和分别为2.34%和41.87%,铁皮石斛和金钗石斛中共有的25个相同的化学成分,相对积分面积和分别为97.12%和50.09%,其中有23个成分在铁皮石斛中的含量高于金钗石斛。结论:铁皮石斛和金钗石斛在生物碱类成分的数量和含量上有很大差别,但就所含的相同化学成分而言,铁皮石斛的质量好于金钗石斛。[6]
9. 用活性炭对黄酮类化合物进行纯化,在下列哪个溶剂中的吸附力最强
活性炭,好的活性炭碘值能达到1100以上